Метод ифа сифилис

Главная » Сифилис » Метод ифа сифилис

Диагностика сифилиса: анализы и их расшифровка

Сифилис – инфекционное венерическое заболевание, вызываемое спирохетами бледной трепонемы. Пути передачи: при сексе, от матери к плоду, трансфузионно, и значительно реже — через раны на коже, которые вступают в контакт с инфекционными поражениями. В зависимости от стадии, выделяют первичный, вторичный, латентный и третичный сифилис.

Прямые способы

Микроскопия в темном поле

Бледные трепонемы не могут расти на питательных средах и не визуализируются под световым микроскопом. Так как обнаружение патогена с помощью обычной микроскопии невозможно, применяют специальный микроскоп с темным полем, где возбудитель виден в виде спирали на темном фоне.

Для проведения микроскопии забирается биоматериал с подозрительного на заболевание очага. Микроскопия в темном поле – это возможный способ оценки кожных поражений, таких как шанкр первичного сифилиса или кондилома вторичного сифилиса. Если материал макулопапулезного очага сухой, исследуют аспират лимфатического узла.

Отрицательный результат не исключает патологический процесс, статистически выявление возбудителя возможно только в 80%.

ПЦР-диагностика

Реакция, направленная на многократное увеличение ДНК бледной трепонемы, позволяет сделать вывод об инфицировании сифилисом или об его отсутствии.

Биоматериал для анализа может быть любым: кровь, содержимое сифилида, спинномозговой жидкости и пр. Тест подходит для инкубационного периода.

ПЦР полностью специфична.

Непрямые серологические анализы на сифилис: трепонемные и нетрепонемные тесты

Серологические анализы (КСР или комплекс серологических реакций) считаются наиболее распространенным способом для диагностики всех стадий сифилиса. Выделяют следующие реакции:

  • агглютинации;
  • преципитации;
  • иммунофлюоресценции;
  • иммуноферментный анализ и пр.

Также серологические анализы на сифилис подразделяют на трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные

При подозрении на приобретенный сифилис выполняют скрининговое тестирование, для чего используют нетрепонемные тесты, определяющие антитела к липоидным антигенам тканей хозяина или возбудителя в разнообразных модификациях. В РФ рутинно выполняют реакцию микропреципитации (РМП), которая позволяет выявить антитела к поврежденным патогеном клеткам в крови. Достоверность скрининга высокая, но специфичность невелика, поэтому тестирование подходит для первичного массового обследования в превентивных целях.

Чувствительность экспресс-тестов оценивается в 78-86% для выявления первичного сифилиса, 100% для вторичного сифилиса и 95-98% для выявления третичного сифилиса.

Специфичность — от 85-99%, иногда- менее, что встречается при следующих состояниях:

  • гестация;
  • менструация;
  • онкология;
  • заболевания соединительной ткани;
  • туберкулез;
  • малярия;
  • вирусные заболевания;
  • болезни печени;
  • вакцинация;
  • «свежий» ИМ;
  • сыпной тиф и пр.

Помимо этого, избыток жиров в рационе, употребление спиртосодержащих напитков и прием некоторых лекарств могут привести к ложноложительным заключениям.

Результаты скринингового тестирования становятся положительными через 1-2 недели после образования шанкра. Нетрепонемные тесты дают отрицательный ответ через некоторое время после лечения. При ВИЧ-статусе нетрепонемные антитела могут выявляться длительно, иногда на протяжении всей жизни (что подтверждается результатами соответствующего рандомизированнного исследования).

Другие разновидности нетрепонемных анализов: VDRL, плазмореагиновый тест (RPR) , проба с толуидиновым красным, реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк).

Реакция Вассермана (RW)

Связывание комплемента – ответ иммунной системы на инфицирование, результат варьируется от отрицательного (ставится «-»), до резко положительного «++++» или 4 плюса.

В начальной стадии первичного сифилиса RW отрицательна.

Трепонемные

Из-за возможности ложноположительных результатов для подтверждения любого положительного или сомнительного результата нетрепонемного анализа, используют трепонемные тесты:

  • реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
  • гемагглютинация (РПГА),
  • иммуноферментный анализ (ИФА) для иммуноглобулинов класса G (IgG) и иммуноглобулина М (IgM);
  • иммуноблоттинг;
  • РИБТ/РИТ (реакция иммобилизации бледных трепонем).

Важно: Трепонемные тесты не используются для оценки эффективности терапии.

РИФ на определение трепонемных АТ класса IgG применяют после положительного результата экспресс-анализов (чувствительность 84% для первичного сифилиса и 100 % при других стадиях, специфичность 96%). Для диагностики врожденного сифилиса у новорожденных не применимы.

В некоторых лабораториях используют «обратные» скрининговые исследования.

CDC (Centers for Disease Control and Prevention, США) рекомендует традиционные исследования, с проверкой количественными нетрепонемными тестами, при положительном результате проводится лечение.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

На собранный материал наносят сыворотку с мечеными флюорохромом антителами, специфичными к антигену бледной трепонемы, возбудитель притягивает к себе иммунные комплексы, из-за чего начинает светиться в люминесцентном микроскопе.

Реакция пассивной гемоагглютинации или РПГА

До появления гемагглютинации (склеивания) эритроцитов с момента внедрения бледной трепонемы должно пройти не менее 4 недель.

Подготовленные эритроциты с фиксированными белковыми фракциями патогена взаимодействуют с плазмой, если есть антитела к сифилису, происходит реакция.

Подходит для подтверждения любой стадии заболевания.

Иммуноферментный анализ

В основу положена реакция антиген-антитело. Выявляются антитела различных классов, которые можно оценить количественно.

Полученные результаты позволяют судить о длительности патологического процесса, успешности проводимого лечения, иммунологическом статусе, активности возбудителей.

Иммуноблоттинг – разновидность ИФА, применяют для углубленной диагностики при всех сомнительных результатах.

Чувствительность и специфичность близка к 100%, на сегодняшний день ультрачувствительный метод идентификации белков.

РИБТ

Способ основан на реакции антиген-антитело. Антигеном служат бледные трепонемы, культивируемые в тестикулах кролика. При взаимодействии с антителами зараженного человека, патогены утрачивают подвижность. Реакция оценивается с помощью микроскопии в темном поле.

Обратите внимание: РИБТ в настоящее время применяют из-за трудоемкости реже, но анализ может быть полезен для решения спорных вопросов (ложноположительные реакции на сифилис).

Дифференциальная диагностика

Наибольшую сложность представляет диагностика третичного сифилиса, что обуславливается симптомами со стороны сердечно-сосудистой и нервной системы, а также проявлениями со стороны кожного покрова.

Пациенты обязательно должны быть обследованы на гонорею, трихомониаз, хламидиоз, бактериальный вагиноз, ВИЧ-инфекцию и гепатиты В и С.

Перечислим заболевания, с которыми проводят дифференциальную диагностику при сифилисе:

  • кандидоз;
  • мягкий шанкр;
  • инфекции мочевыводящих путей;
  • дерматологические проявления герпеса;
  • генитальные бородавки (ВПЧ);
  • донованоз;
  • ВИЧ-инфекция и СПИД;
  • венерическая лимфогранулема;
  • вирус ветряной оспы;
  • фрамбезия.

С чего начинается диагностика сифилиса

Изначально проводится беседа с пациентом, во время которой уточняются детали: когда был подозрительный половой контакт и какие есть жалобы.

После сбора анамнеза переходят к физикальному осмотру, особое внимание уделяется области гениталий и ануса, слизистым оболочкам и лимфатическим узлам. Предварительный диагноз уже может быть установлен. Окончательная верификация происходит с помощью лабораторных анализов.

Если сказать просто о сложном, то одни анализы выявляют возбудителя сифилиса, а другие отражают реакцию организма на внедрение бледной трепонемы.

Для установки окончательного диагноза РПГА следует дополнить 1 трепонемным и 1 нетрепонемным анализом.

Диагностика сифилиса у беременных

Проводятся обязательное исследование на сифилис несколько раз в течение беременности.

Направление на анализ КСР выдается во время первого визита женщины в консультацию, и за время беременности трижды выполняется обследование. Пациентки из высокой группы риска с отягощенным анамнезом: ИППП, асоциальные, зависимые и пр. требуют особенно пристального внимания.

Если результаты анализа положительные, проводят более глубокую диагностику, и по показаниям назначают лечение, которое зависит от стадии и клинических проявлений.

Диагностика врожденного сифилиса

Большинство детей с врожденным сифилисом рождаются у нелеченных матерей, либо получивших терапию слишком поздно.

Трепонемные тесты с использованием неонатальной сыворотки не рекомендуются из-за пассивного переноса антител IgG. Все дети, рожденные от матерей с сифилисом, должны обследоваться с помощью количественного нетрепонемного серологического теста (RPR или VDRL), выполненного с использованием сыворотки крови новорожденного.

Как трактовать результаты серологических исследований

Реакция микропреципитации, РИФ и РПГА отрицательны – норма, положительны – подтверждение сифилиса.

Реакция микропреципитации отрицательна, остальные положительны – сифилис в анамнезе после проведения специфической терапии, либо поздняя стадия.

Отрицательная РИФ при положительных РПГА и реакции микропреципитации – результат вызывает сомнения, повторная комплексная оценка.

Отрицательный результат РИФ и микропреципитации, но положительная РПГА – состояние после успешной антибиотикотерапии либо ложноположительный результат.

Положительная РИФ при отрицательных РПГА и реакции микропреципитации – ранняя стадия, проведенное лечение или недостоверность результата.

Положительная реакция микропреципитации, не подтвержденная ни РПГА, ни РИФ – отсутствие сифилиса.

Инструментальное исследование при сифилисе

Инструментальная диагностика проводится в зависимости от вовлеченности органов. Например, гранулематозное поражение печени можно увидеть при компьютерной томографии брюшной полости.

Рентгенография органов грудной клетки у пациентов с третичным сифилисом может показать дилатацию аорты. Линейная кальцификация по ходу аорты свидетельствует в пользу сифилитического аортита.

Ангиография может быть полезна в диагностике абдоминальной сифилитической аневризмы.

При диагностике нейросифилиса при соответствующих симптомах используют люмбальную пункцию с забором спинномозговой жидкости.

Мишина Виктория, уролог, медицинский обозреватель

Источник: https://okeydoc.ru/diagnostika-sifilisa-analizy-i-ix-rasshifrovka/

Метод диагностики сифилиса: иммуноферментный анализ крови – ИФА (положительный)

Анализ ИФА на сифилисНи для кого не является секретом, что своевременная диагностика любого заболевания означает едва ли не половину успеха его лечения. Очень важно подобрать именно те анализы, методы или способы диагностики, которые действительно помогут поставить точный диагноз, а не запутают врача еще сильнее. Иммуноферментный анализ крови давно зарекомендовал себя методом, позволяющим не только получить положительный или отрицательный ответ на вопрос – болен ли человек какой-либо половой инфекцией, но и определить, на какой стадии развития находится заболевание, а также понять, была ли подобная проблема у пациента в анамнезе. ИФА на сифилис на сегодняшний день – один из наиболее чувствительных и специфичных анализов, при этом его точность составляет около 90%.

Тест-системы, которые использует метод иммуноферментной диагностики, предназначены для выявления не только сифилиса, но и множества других инфекций: гепатит, ВИЧ, ЦМВ, герпес, токсоплазмоз и т.д. Анализ ИФА на сифилис позволяет определить антитела (IgG, IgA, IgM) к бледной трепонеме, содержащейся в крови больного человека. Этот метод позволяет увидеть взаимодействие антител со специальными препаратами, в которых заложены антигены, способные в комплексе с антителами образовать признак заболевания, хорошо заметный при различных способах диагностики.

В основе иммуноферментного анализа на сифилис лежит метод взаимодействия выявляемых в крови антител с антигеном возбудителя инфекции. Диагностика будет зависеть от того, какие именно антитела использовались: могут выявляться либо антитела определенного класса, либо в общем. Для диагностики этим методом кровь берется натощак из вены.

ИФА анализ крови на сифилис подразумевает использование трех классов иммуноглобулинов: G, M, A. Указанные иммуноглобулины имеют одно важное для диагностики сифилиса методом ИФА свойство: они вырабатываются в строго определенной последовательности, благодаря чему ИФА позволяет определить, на какой именно стадии находится процесс и какова динамика его развития:

  • Иммуноглобулин М в крови показывает, сколько времени прошло с момента заражения. Однако не всегда положительные результаты его наличия означают наличие венерического заболевания: возможно, у человека произошло обострение какой-либо хронической болезни, вызвавшее подобную реакцию.
  • Наличие антител IgA означает, что с момента заражения прошло не менее месяца.
  • Поскольку иммунитет к данному заболеванию не вырабатывается, положительный результат обследования на IgG может показывать как пик заболевания, так и период после пройденной терапии.

Что означает ИФА на сифилис положительно?

Следует отметить, что ИФА положительный на сифилис – это не повод для паники. Дело в том, что такой метод позволяет определить лишь наличие антител, но не возбудителя. Следовательно, если результат ИФА сифилис – положительно, это еще не является основанием для того, чтобы поставить диагноз. Однако в научном мире тест-системы совершенствуются ежедневно, и на сегодняшний день это означает, что в большинстве случаев результатам анализов все же можно доверять.

Результатов диагностики бывает всего два: «положительный» и «отрицательный». В первом случае положительные данные означают, что у пациента заболевание в одной из стадий, либо что он совсем недавно окончил курс лечения. Отрицательный же результат иммуноферментного исследования крови означает либо отсутствие заболевания, либо очень раннюю стадию его развития.

Источник: http://www.zppp.saharniy-diabet.com/sifilis/analizy/ifa

Сифилис: иммуноферментный метод диагностики сифилиса

Трепонемные антитела класса IgM в сыворотке крови у здоровых людей не определяются.

Из всех серологических методов диагностики сифилиса метод ИФА наиболее чувствителен (свыше 95%) и специфичен (100%). При его использовании выявляют специфические (трепонемные) антителаклассов IgM и IgG. Антитела класса IgM имеют большое значение для диагностики первичного, вторичного и врождённого сифилиса. Выявление антител IgM свидетельствует о наличии у больного первичного, вторичного или врождённого сифилиса. Антитела класса IgM выявляют в сыворотке крови со 2-й недели после заражения. В процессе лечения содержание антител класса IgM у больного снижается. По их количеству можно следить за эффективностью проводимого лечения. После успешного лечения содержание антител класса IgM снижается до отрицательных результатов. Определение антител класса IgM имеет большое значение для диагностики ранних форм врождённого сифилиса, дифференциальной диагностики рецидивов, реинфекции. Тест на определение антител IgM может быть отрицательным в некоторых случаях позднего латентного сифилиса и нейросифилиса. Определение антител IgM методом ИФА имеет очень высокую чувствительность при врождённом сифилисе (100%) и более низкую - при первичном сифилисе (82%), вторичном (60%), латентном (53%), нейросифилисе (34%) и третичном сифилисе (11%) и очень высокую специфичность.

Антитела класса IgG появляются в острый период заболевания и могут сохраняться у вылечившихся пациентов пожизненно.

Метод ИФА применяют для диагностики сифилиса, дифференцирования ложноположительных результатов, полученных в МР, контроля за эффективностью лечения.

Источник: https://ilive.com.ua/health/sifilis-immunofermentnyy-metod-diagnostiki-sifilisa_84961i15984.html

Сифилис - диагностика

Диагностика сифилиса зачастую представляет сложности. Наибольшую сложность в диагностике представляют хронические формы сифилиса, вторичный сифилис, латентная фаза сифилитического поражения. Однако выявление данного заболевания должно строиться по стандартной схеме.

Обращение к врачу венерологу – зачем это нужно?

На первом этапе диагностики необходима личная консультация врача венеролога. На основании личной консультации врач венеролог в состоянии выставить клинический диагноз.

Анамнез – сбор необходимой для выявления диагноза информации: жалобы пациента, информация о некоторых аспектах половой жизни и контактах с подозрительными на наличие венерических заболеваний лицами. Перенесенные в прошлом венерические заболевания, информация о результатах их лечения. Вся эта информация позволяет лечащему врачу сконцентрироваться на наиболее вероятных заболеваниях заставивших пациента обратиться за специализированной помощью.

Далее следует клинический осмотр. Наиболее внимательному осмотру подвергаются слизистые и кожные покровы половых органов, область ануса, слизистая ротовой полости. Повышенное внимание уделяется ощупыванию наружных групп лимфоузлов, ощупыванию выявленных инфекционно некротических очагов. Часто на данном этапе диагноз сифилиса с достаточно высокой степенью вероятности можно выставить.

Однако для выставления окончательного диагноза, а так же для слежения за динамикой процесса в ходе проводимого лечения, необходимо проведение лабораторных анализов.

Лабораторное подтверждение сифилиса – что в себя включает и как производится?

Лабораторную диагностику сифилиса можно разделить на 2 группы проводимых исследований: первая позволяет выявить непосредственно возбудителя сифилиса, вторая же выявляет иммунологические изменения, происходящие в организме при сифилисе.

Как можно выявить непосредственно возбудителя сифилиса – бледную трепонему?

1. Темнопольная микроскопия. Вследствие некоторых внешних особенностей бледная трепонема плохо окрашивается традиционными красителями, используемыми в микроскопии бактерий. Потому имеется смысл использование специального темнопольного микроскопа. В нем на фоне темного фона хорошо контрастируется спиралевидная полоска - бледная трепонема.

Биоматериал для темнопольной микроскопии берется из первичного очага инфекции – из сифилитической специфической язвы, кожной сыпи, эрозии.

2. Прямая реакция флюоресценции. Данному методу диагностики предшествует обработка биоматериала специальной флюоресцирующей сывороткой, что приводит к прикреплению на поверхности бледной трепонемы специфических иммунных комплексов. В результате этой реакции при микроскопии обработанного биоматериала в люминесцентном микроскопе бледная трепонема выглядит светящейся и нарядной.

3. ПЦР (полимеразная цепная реакция). Данный метод позволяет выявить ДНК инфекционного агента, делая его присутствие в организме пациента явным.

Как выявляются иммунологические признаки наличия сифилиса, и зачем их нужно выявлять?

Вся группа исследований иммунологических показателей с целью диагностики инфекционных заболеваний называется серологией. В наше время существует множество серологических методов диагностики, однако всех их объединяет то, что в диагностике биоматериалом является кровь пациента. В отношении диагностики сифилиса все серологические тесты можно разделить на трепонемные – выявляющие антитела против структурных элементов бледной трепонемы и нетрепонемные – выявляющие иммунологические изменения, связанные с последствием деятельности бактерии.

Нетрепонемная серология

1. Микрореакция преципитации (VDRL). Данное исследование выявляет в крови пациента антитела, вырабатываемые иммунной системой против клеток, поврежденных бледной трепонемой. Данный тест обладает высокой достоверностью, но малой специфичностью. Дело в том, что выявляемые антитела могут присутствовать в крови при многих заболеваниях и патологических состояниях. Потому данный тест используют лишь как скрининг заболевания, выявляющий подозрение на заболевание. Однако этот метод обладает неоценимым преимуществом в диагностике эффективности проводимого лечения. В случае излечения пациента микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном становится негативной в отличие от других серологических видов исследования, которые еще долгое время могут давать положительный результат.

2. Реакция Вассермана. Данное исследование связано с реакцией связывания комплемента – один из механизмов реализации иммунологического ответа.

Тест оценивается в плюсах (не в крестах, как считают многие!). И реакция бывает отрицательной (в результате обследования указывается минус), сомнительной (в результате обследования указывается 1 плюс +), слабоположительной (в результате обследования указывается 2 плюса ++), положительная реакция (в результате обследования указывается 3 плюса +++), резко положительная реакция (в результате обследования указывается 4 плюса ++++).

Трепонемная серология

1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный вид исследования выявляет антитела, вырабатываемые иммунной системой инфицированного человека. Для этого производится взаимодействие сыворотки крови пациента и специфического препарата, содержащего антитела. После смешивания плазмы крови пациента и реактива со специфическими антителами, меченными специальным флюоресцирующим веществом, происходит их связывание. Исследование производится посредством специального люминесцентного микроскопа.

2. Иммуноферментный анализ (ИФА). О данном анализе стоит рассказать поподробнее. Так как он является основным при выявлении большинства инфекционных заболеваний. Основан метод на избирательной высокоспецифичной реакции антиген – антитело. Одной из особенностей данного анализа является то, что с его помощью можно выявить антитела различных классов (IgA IgM IgG) . Так же важным является способность данного анализа определять количество выявляемых антител. В итоге определение типа антител и его количественной составляющей позволяет сделать ряд выводов о длительности заболевания, динамике процесса, активности возбудителя и иммунной системы пациента. В итоге данный анализ оказался незаменимым в деле диагностики инфекционных заболеваний, а так же как контроль динамики заболевания на фоне проводимого лечения.

3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Данная реакция основывается на иммунологически индуцированном склеивании эритроцитов. Механизм данной реакции заключается в том, что предварительно подготавливаются эритроциты, на поверхности которых фиксированы белковые компоненты бледной трепонемы. Потому, при смешивании с плазмой крови, содержащей антитела к трепонеме, происходит склеивание эритроцитов – кровь из красной превращается в зернистую. Положительной реакция гемагглютинации становится спустя 4 недели после инфицирования. После успешного лечения сифилиса данная реакция в течение всей жизни может оставаться положительной.

Из вышеизложенного понятно, что дело диагностики, контроля эффективности лечения и излеченности – достаточно сложная и трудоемкая работа. А уж пациенту, не имеющему медицинского образования разобраться в целях и результатах исследования невозможно. Однако мы постараемся изложить в доступной форме динамику иммунологических изменений на разных стадиях сифилиса, и лабораторные показатели выявляющие данные изменения.

Итак – немного теории. После инфицирования иммунные клетки впервые встречаются с бледной трепонемой. Идентифицируя ее как чужеродный микроорганизм, иммунокомпетентные клетки начинают активное формирование иммунного ответа. Антитела, специфически действующие на бледные трепонемы класса IgM, обнаруживаются в крови пациента спустя 7 дней после инфицирования, антитела IgG синтезируются позже – спустя через 4 недели. Эти 2 класса антител различны по своей структуре, но важно для диагностики то, что IgM синтезируется на ранних стадиях инфицирования (что говорит о недавнем инфицировании) или при наличии высокой активности инфекции. Выявление IgG говорит лишь о формировании стойкого иммунитета к данной инфекции, лишь серия анализов титра антител в динамике позволяет оценить излеченность заболевания или активность инфекции. Антилипидные (неспецифические) иммунологические комплексы активно синтезируются спустя 4 - 5 недель после инфицирования.

Важными является тот факт, что в период клинических проявлений сифилиса в крови выявляются специфичные для бледной трепонемы антитела как IgM, так и класса IgG (суммарные антитела). Важным параметром в процессе лечения является изменение количественных параметров антител. Правильно подобранное лечение способствует резкому снижению концентрации IgM, на фоне стабильного уровня IgG – эти показатели говорят о сформировавшемся стойком иммунитете к бледной трепонеме на фоне снижения ее инфекционной активности. Необходимо обратить внимание на то, что специфические антитела к трепонеме могут сохраняться в крови человека на долгие годы, давая положительные результаты некоторых видов исследований.

Как интерпретировать результаты серологических исследований?

В настоящее время в медицинской практике нашли широкое применение 3 реакции: микрореакция преципитации, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).

микрореакция преципитацииреакция иммунофлюоресценции (РИФ)реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)Интерпретация
- - - Инфицирование отсутствует или диагностика проведена слишком рано (до 7 дней после инфицирования)
+ + + Подтверждение сифилиса
- + + Состояние после проведенного лечения сифилиса или поздняя стадия сифилиса
+ - + Велика вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов (рекомендуется повторить серологическую диагностику)
- - + Велика вероятность ложноположительной реакции РПГА, или состояние после адекватного лечения сифилиса
- + - Свидетельство раннего сифилиса или состояния после произведенного лечения, ложноположительная реакция РИФ
+ - - Ложноположительная реакция микропреципитации

Из вышеизложенной таблицы с результатами основных серологических тестов видно, что диагностика сифилиса не может быть основана лишь на одних серологических исследованиях. Для выставления окончательного диагноза помимо анализов крови, необходим комплекс клинических исследований: анамнез, личный осмотр пораженных областей, выявление подозрительных контактов.

Автор: Ткач И.С. врач, хирург офтальмолог

Источник: https://www.tiensmed.ru/news/sifilis-diagnostika1.html