Неспецифические тесты на сифилис

Главная » Сифилис » Неспецифические тесты на сифилис

Диагностика сифилиса – современные методы микробиологических и серологических исследований

Диагностика сифилиса – современные методы микробиологических и серологических исследований

Среди венерических заболеваний сифилис занимает первые позиции по распространенности. Заболевание передается от больного к здоровому преимущественно половым путем. Диагностика сифилиса – сложный, поэтапный процесс, который не всегда приносит результат.

Подозрение на сифилис – к какому врачу идти?

Большое распространение заболевание получило потому, что многие молодые люди просто не знают, как определить сифилис, какие обследования необходимо пройти. Лечением половых инфекций занимаются врачи венерологи или дерматовенерологи, так как в большинстве случаев подобные инфекции сопровождаются повреждением кожных покровов. Медики советуют с профилактической целью обследоваться каждому пациенту репродуктивного возраста. Болезнь часто протекает в скрытой форме, поэтому выявить ее можно не всегда.

Методы диагностики сифилиса

Диагностические мероприятия по выявлению заболевания основываются на клинических и лабораторных данных. Диагноз «сифилис» ставится только после получения положительных результатов лабораторного исследования. Ранняя диагностика сифилиса исключает прогрессирование заболевания. Первичный сифилис определяется исследованием отделяемого твердого шанкра эрозивных папул. Среди основных методов лабораторной диагностики сифилиса необходимо выделить:

  1. Бактериоскопию.
  2. Серологическое исследование (специфическое и неспецифическое).
  3. Гистологию (при третичном сифилисе).
  4. Микроскопию (исследование нативного препарата, отделяемого эрозивных или язвенных высыпаний, пунктата из лимфоузла).

Микробиологическая диагностика сифилиса

Основу данного типа обследования составляет бактериоскопический метод диагностики сифилиса. Он предполагает обнаружение T.pallidum в материале, забранном из очагов воспаления:

  • твердый шанкр;
  • эрозивные нарушения;
  • лимфоузлы;
  • спинной мозг.

Предварительно врач протирает место забора материала тампоном с физраствором, затем раздражает поверхность эрозии специальной петлей, пока из нее не покажется тканевая жидкость.

При этом избегают смешивания материала с кровью. Жидкость помещается на предметное стекло. Препарат, полученный таким способом, исследуется с помощью микроскопа. Методы микробиологической диагностики сифилиса основываются на обнаружении возбудителя в материале. При отрицательном результате исследование проводят несколько дней подряд для полного исключения болезни.

Серологическая диагностика сифилиса

Для выявления и подтверждения диагноза «сифилис» в случае поздних и скрытых форм болезней основы диагностики составляет серологический метод. В большинстве случаев для диагностики сифилиса используют реакцию Вассермана. Метод предполагает исследование венозной крови пациентов, которые обнаруживают антитела к антигенам возбудителя. Такой анализ на бледную трепонему помогает выявить заболевание даже при отсутствии явных клинических симптомов.

В зависимости от состава используемых для диагностики веществ, серологические методы подразделяют на:

  1. Специфические (трепонемные).
  2. Неспецифические (нетрепонемные).

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты – это метод диагностики, использующий в качестве основы специфические антигены Treponemapallidum. Метод используется как для постановки, так и для подтверждения диагноза, для дифференциальной диагностики сифилиса. Все специфические тесты имеют высокую чувствительность и точные результаты. Механизмы проведения специфических тестов неодинаковы, поэтому они имеют различные показания к применению. К трепонемным тестам относят следующие методы лабораторной диагностики сифилиса:

  1. Реакцию связывания комплемента (реакция Вассермана, РВ) с трепонемным антигеном – РСКт.
  2. Реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ.
  3. Реакцию иммунофлюоресценции – РИФ. Применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс; РИФц – реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью или спинномозговой жидкостью.
  4. Реакцию пассивной гемагглютинации – РПГА.
  5. Иммуноферментный анализ – ИФА.
  6. Иммуноблотинг.

Нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты на сифилис используются в качестве отборочных и не подходят для окончательной диагностики, выставления диагноза. Они активно применяются для обследования больших групп населения с целью профилактических осмотров при возникновении неблагоприятной эпидемиологической ситуации. Тест обладает простотой проведения, имеет высокую чувствительность. Результат диагностики оценивается врачом. Чувствительность неспецифических тестов при ранних формах заболевания составляет около 70 %, а при вторичном сифилисе – 100 %.

К нетрепонемным тестам диагностики сифилиса относятся:

  1. RPR (RapidPlasmaReagins).
  2. Тест с инактивированной сывороткой – МРП (микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном).

Данные флокуляционные тесты характеризуются простотой оценки. В ходе реакции образуется комплекс «антиген + антитело», который формирует хлопья, различимые с помощью увеличительного стекла. Роль антигена в тесте выполняет кардиолипиновый антиген, который получают из сердечной мышцы быка. Связь с антигенами возбудителя сифилиса при этом отсутствует, поэтому тесты и получили название нетрепонемные.

Экспресс-диагностика сифилиса

Современные методы диагностики сифилиса предполагают выявление заболевания на ранних стадиях. В качестве метода экспресс-диагностики используется RapidPlasmaReagin(RPR). Тест направлен на определение концентрации в крови антител к возбудителю сифилиса. При заражении бледная трепонема в организме формирует защитные антитела IgG и IgM. Наличие их в образце забранной крови является косвенным доказательством присутствия в организме бледной трепонемы. Данная диагностика сифилиса помогает установить точный срок продолжительности заболевания, время инфицирования.

Анализы на сифилис – расшифровка

Современная лабораторная диагностика сифилиса основывается следующих методах:

  • нетрепонемный тест – RPR или VDRL;
  • трепонемные тесты – РИФ и РПГА.

В странах СНГ для диагностики сифилиса чаще применяют реакцию Вассермана, также реакцию иммобилизации бледных трепонем – РИБТ. Оценку полученных результатов производит только врач, который учитывает клинические проявления заболевания, стадию патологии, состояние пациента. С примерными результатами исследований можно ознакомиться в таблице ниже.ото

Дифференциальная диагностика сифилиса

Когда у врача после первичного осмотра возникает подозрение на сифилис, он направляет пациента для сдачи крови на RV. Если результаты исследования подтвердили наличие бледной трепонемы в организме, проводится дифференциальная диагностика с определением стадии заболевания. При первичном сифилисе чаще бывают положительными РИФ и ИФА, однако это не позволяет выставить диагноз «сифилис».

Диагностика вторичного сифилиса не вызывает затруднений – резким положительным является результат по всем серологическим реакциям. РИБТ положительна больше чем у 50 % больных. Третичная форма сифилиса практически не вызывает затруднений. Серологические реакции положительные в 50–90 % случаев. Диагностика скрытого серопозитивного сифилиса основывается на серологических реакциях с подтверждением результата с помощью РИБТ.

Источник: https://womanadvice.ru/diagnostika-sifilisa-sovremennye-metody-mikrobiologicheskih-i-serologicheskih-issledovaniy

Анализ на сифилис: как сдавать кровь

Одним из самых распространенных заболеваний, передающихся преимущественно половым путем, является сифилис. Современной медицине под силу справиться с ним, но, если не лечить больного, его ждет медленная и мучительная смерть с большим количеством симптомов. По этой причине очень важно регулярно сдавать анализ крови на сифилис. Такой подход помогает избежать серьезных проблем со здоровьем как среди молодежи, так и у взрослых людей. За счет информирования в вопросах профилактики, заболеваемость этим венерическим заболеванием медленно, но неуклонно снижается.

Что такое сифилис

Каждому человеку было бы неплохо знать о сифилисе больше. Он является хроническим системным венерическим инфекционным заболеванием, которое поражает кожу, слизистые оболочки, нервную систему, кости и внутренние органы с последовательной сменой стадий болезни. Возбудителем является бактерия бледная трепонема (Treponema pallidum), которая негативным образом действует на организм человека. Раньше инфекция называлась «Галльским заболеванием».

Учеными было доказано, что бледная трепонема влияет не только на человека, у которого был обнаружен сифилис, но сказывается и на наследниках. Специалисты объясняют это тем, что бактерия оказывает влияние на хромосомы. Протекает заболевание в три этапа:

  1. Первичный. Наблюдается формирование сифилитических язвочек (твердых шанкров) и воспаление узлов лимфатической системы.
  2. Вторичный. На коже начинает образовываться сыпь. Появляется высокий риск заразить других людей.
  3. Латентный. Симптоматика отсутствует, но пациент остается заразным. Если болезнь диагностирована при беременности, то высок риск того, что инфекция будет врожденной, т.е. передастся от матери к плоду.

Примерно у 30-ти процентов больных специалисты диагностируют заболевание третичного вида. Инфекция тяжело поражает кожный покров, важные органы, мозг и кости. По данным на 2014-й год в России 26 человек из 100 тысяч населения страдали этим венерическим заболеванием. Для диагностики сифилиса потребуется сдать кровь на анализы. Общий анализ крови при этом венерическом заболевании несет в себе мало информации, поэтому для диагностики не используется.

Диагностика сифилиса

Для того чтобы провериться на наличие бледной трепонемы, человеку необходимо пройти внешний осмотр и лабораторную диагностику, а также исследование крови на сифилис. Анализ предоставит возможность врачам обнаружить в крови специфические (IgG и IgM) и неспецифические антитела или саму бактерию. Выбор метода диагностики зависит от стадии болезни.

Для обнаружения специфических антител используется возбудитель сифилиса, т.е. бледная трепонема. Такой тест называется трепонемным. Неспецифические антитела специалисты обнаруживают в материале, высвобождаемом из разрушенной клетки трепонемы – это неспецифический антифосфолипидный, реагиновый или РПР тест (RPR). Описанные способы являются не единственными, проверить кровь на наличие возбудителей сифилиса, можно анализами на:

  • полимеразную цепную реакцию;
  • реакцию пассивных агглютинаций;
  • реакцию иммунофлюоресценции;
  • реакцию Вассермана;
  • иммуноблот на сифилис (иммуноблоттинг).

Перечисленные исследования широко применяют для диагностики и наблюдения за ходом заболевания. С предварительным диагнозом анализ крови сдается натощак. Бывают случаи, когда после излечения у больного повторно забирается кровь на проведение исследования, и результат выходит положительным. Среди специалистов он известен как сомнительный анализ на сифилис. Чтобы очистить кровь, врачи назначают определенные процедуры.

Лаборант проводит исследование

Показания к диагностике

Есть несколько показаний, при которых обязательно следует пройти соответствующие исследования. Особенно это касается беременной женщины, которая должна сдавать развернутый анализ на наличие возбудителя венерического недуга три раза: первый сдается, когда ее ставят на учет, второй – на сроке 31 неделя, третий – перед родами. Если у беременной женщины получен положительный анализ на сифилис, то малышу после рождения тоже назначают обследования. Другие показания:

  • Пациент подозревает, что у него есть сифилис. Многих больных пугают высыпания на половых органах.
  • Имела место интимная близость с человеком, больным сифилисом.
  • Пациент находится в местах лишениях свободы.
  • Человек имеет желание стать донором и ему необходимо сдать сперму и кровь.
  • Необходимость пройти медицинскую комиссию для приема на работу. Это касается всех тех, кто устраивается работать в школе или детском саду, больнице, кафе, санатории, продуктовом магазине и т.п.
  • Если у пациента увеличенные лимфатические узлы (лимфаденит), или у него диагностировали лихорадку неопределенного характера.
  • Человек осуществляет прием наркотических веществ.

Подготовка

Сдача анализа на наличие бледной трепонемы является ответственным моментом, т.к. от полученных результатов в непосредственной зависимости находится жизнь пациента. Время подготовки для данного мероприятия измеряется не сутками, а неделями. Необходимо придерживаться нескольких рекомендаций:

  • Исключите жирную пищу за 24 часа до сдачи анализа. Так пациент предотвратит ложноположительный результат из-за оптического явления, связанного с жирами.
  • Исследование на сифилис действительно только на голодный желудок, поэтому специалисты рекомендуют не кушать около 7 часов перед прохождением обследования.
  • Категорически запрещается за сутки до похода к врачу курить и употреблять спиртные напитки. Это может помешать специалистам оценить реакцию.
  • Нельзя принимать антибиотики за неделю до сдачи крови.

Как берут анализ на сифилис

Общий анализ крови для определения этого венерического заболевания считается бессмысленным – чтобы распознать сифилис, пациентам необходимо пройти комплексное клинико-лабораторное обследование. Для проведения исследования могут браться следующие образцы:

  • кровь из вены и пальца;
  • отделяемое твердого шанкра (язвы);
  • участки регионарных лимфоузлов;
  • ликвор (спинномозговая жидкость).

Чтобы исключить или подтвердить диагноз сифилиса, анализ выбирается непосредственно специалистом – его предпочтение будет основываться на периоде развития заболевания. Результат при этом можно получить через сутки, а в некоторых случаях даже через несколько недель. Конкретные сроки зависят от выбранного метода диагностики, оборудования медучреждения и того, насколько загружена его лаборатория. В целом, неважно, сколько времени занимает выяснение результатов исследования, главное, какой результат оно покажет.

Виды анализов

На начальной стадии часто используется бактериоскопическая методика, которая основана на определении возбудителя (бледной трепонемы) под микроскопом. Широко применяется серологическая реакция на сифилис – этот тип теста базируется на определении вырабатываемых организмом антител и микробных антигенов в биологическом материале. Бактериологическое исследование не осуществляется ввиду того, что в искусственных условиях на питательной среде возбудитель болезни растет очень плохо. Все методики обнаружения бледной трепонемы делятся на две большие группы:

1. Прямые, которые обнаруживают непосредственно сам микроб:

  • RIT-тест. Исследуемым материалом специалисты заражают кролика.
  • Темнопольная микроскопия. С ее помощью трепонема выявляется на темном фоне.
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция). При этой методике обнаруживаются области генетического материала микроорганизма. Этот тип исследования делается дольше остальных.

2. Непрямые, или серологические. Они основываются на выявлении антител к микробу, выработка которых осуществляется организмом в качестве ответа на инфицирование. Среди серологических исследований выделяют две группы:

Трепонемные:

  • иммуноблоттинг;
  • ИФА, или иммуноферментный анализ;
  • РПГА, или реакция пассивной гемагглютинации;
  • РИТ/РИБТ, или реакция иммобилизации трепонем;
  • РСКт, или связывание комплемента с трепонемным антигеном;
  • РИФ, или реакция иммунофлюоресценции.

Нетрепонемные:

  • РМП, или реакция микропреципитации;
  • РСКк, или реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном;
  • RPR, или тест быстрых плазменных реагинов;
  • взятие пробы с толуидиновым красным.

Прямые тесты

Использование прямых тестов убедительно доказывает наличие возбудителей заболевания при их обнаружении с помощью микроскопа. Вероятность сифилиса в таком случае достигает 97 процентов. Правда, обнаружить микробы можно только у 8 из 10 больных, по этой причине отрицательный тест не исключает наличие болезни полностью. Такого рода диагностика проводится в первичном и вторичном периодах, когда имеется кожная сыпь или твердый шанкр. В образцах, отделяемых от этих заразных элементов, специалист и ищет возбудителей заболевания.

Более эффективным, но вместе с этим более сложным и дорогим анализом, является обнаружение возбудителей после их предварительной обработки т.н. флуоресцентными антителами. Последние представляют собой вещества, которые «прилипают» к трепонемам и образуют их свечение в поле зрения микроскопа. Чувствительность способа начинает снижаться при обработке сыпи и язв антисептиками, большой длительности заболевания и после лечения.

Биологическая методика диагностики RIT считается высокоспецифичной, но дорогой. Результата приходится дожидаться долго, пока у зараженного кролика не разовьется болезнь. В настоящее время этот способ исследования почти не практикуется, хотя он считается самым точным из всех известных. Хорошим анализом крови для обнаружения генетического материала возбудителя венерической болезни, считается ПЦР. Единственным его ограничением является относительно высокая стоимость проведения.

Серологические методы

При проведении серологического теста определяются микробные антигены и антитела. Последние вырабатываются в биологических материалах как ответ организма на инфекцию. На их выявлении и основывается непрямой метод исследования, который бывает:

  • нетрепонемным;
  • трепонемным.

Нетрепонемные тесты

Самым известными из анализов РСКк является реакция Вассермана (RW). Этот метод быстрой диагностики (экспресс-анализ) основан на сходной реакции антител из крови пациента на кардиолипин, который получен из бычьего сердца, и сами трепонемы. Итогом такого взаимодействия становится образование хлопьев. В российских медучреждениях этот тип исследования широко применяется. Минус его заключается в низкой специфичности.

Ложноположительный анализ на наличие сифилиса может встречаться при болезнях крови, туберкулезе, системной красной волчанке, менструальном кровотечении, беременности, после рождения малыша и в некоторых других случаях. По этой причине при положительной RW используются более точные методики исследования. После заражения венерическим заболеванием реакция дает положительный результат спустя пару месяцев. При вторичном сифилисе она будет положительной почти у всех пациентов.

Сходным механизмом обладает реакция микропреципитации – этот способ вытесняет в России тест Вассермана. Методика является недорогой, легкой в исполнении и хороша тем, что дает быструю оценку. При ней тоже могут появляться ложноположительные результаты. Оба названных теста применяются специалистами в качестве скрининговых. РМП станет положительной спустя месяц после образования твердого шанкра. Для проведения этого исследования берется кровь из пальца.

RPR является еще одной разновидностью реакции с антигеном (кардиолипиновым). Эта методика применяется при:

  • подозрениях на сифилис;
  • обследовании доноров;
  • скрининге населения.

Еще одним методом этой категории тестов является проба с толуидиновым красным. Все названные способы применяют для того, чтобы оценивать эффективность лечения. Они считаются полуколичественными, т.е. возрастают во время рецидива инфекции и уменьшаются, когда больной идет на поправку. Отрицательные результаты тестов этой категории с большой долей вероятности говорят о том, что обследуемый не болен. По этой причине, они используются для оценки излечивания – первый анализ сдается спустя 3 месяца после окончания курса лечения.

Трепонемные

Тесты этой категории основываются на применении трепонемных антигенов – это существенно повышает их диагностическую ценность. Применяют их при:

  • подозрении на сифилис;
  • диагностике скрытых форм;
  • положительном скрининг-тесте (реакции микропреципитации);
  • ретроспективной постановке диагноза, когда пациент уже перенес болезнь;
  • распознавании ложноположительного результата скрининга.

К самым качественным (высокоспецифичным и высокочувствительным) методам относятся РИФ и РИТ. Минусы этих способов заключаются в сложности, длительности, необходимости наличия обученного персонала и современного оборудования. У многих излечившихся людей трепонемные тесты остаются положительными на протяжении многих лет, поэтому их не используют как критерий излеченности:

  • РИФ становится положительной только спустя 2 месяца после инфицирования. Если она положительная – высока вероятность наличия болезни, если отрицательная – человек здоров.
  • РИТ часто используется при положительных результатах РМП для того, чтобы подтвердить или исключить болезнь. Она отличается высокочувствительностью. За счет этого можно с большой точностью подтвердить или опровергнуть болезнь. Правда, результат станет положительным только спустя 3 месяца после заражения.

Более чувствительным, чем РИФ, является иммуноблоттинг, при этом он уступает РПГА. Эту методику применяют нечасто и в большинстве случаев для диагностики бледной трепонемы у новорожденных. Перечисленные способы не подходят для проведения скрининга (быстрого выявления заболевания), т.к. становятся положительными позднее, нежели реакция микропреципитации. Более современными высокоинформативными методами исследований являются РПГА и ИФА:

  • Тест ИФА дает положительный результат спустя 3 недели после инфицирования. Недостаток методики в том, что результат бывает недостоверным. Ложноположительная реакция может возникнуть при нарушении обмена веществ, системном заболевании и у детей, которые рождены больными материями.
  • Метод РПГА дает положительный результат при появлении твердого шанкра (первичном серопозитивном сифилисе) – примерно через месяц после инфицирования. Он особенно ценен при исследовании врожденных, скрытых и поздних форм болезни. Для точности диагностического мероприятия РПГА нужно дополнить как минимум одним трепонемным и одним нетрепонемным тестом. Минус РПГА заключается в сохранении положительной реакции на протяжении длительного времени, поэтому он не применяется как критерий излеченности.

Оба описанных ваше способа диагностики бледной трепонемы являются недорогими – они выполняются в больших количествах и дают быстрый результат. Эти тесты могут использоваться, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз. Недостатки методик, входящих в категорию серологических, привели к появлению более совершенных типов исследования. Они не дают ошибок, но стоят дорого и применяют редко – это масс-спектрометрия, газовая хроматография.

Расшифровка анализа на сифилис

Ни один из предлагаемых на сегодняшний день способов диагностики венерического заболевания не гарантирует результат на 100%. В любом случае есть погрешность, которая достигает 10%. Расшифровка специфических и неспецифических тестов серодиагностики:

Название методики

Описание

Расшифровка результатов

Микрореакция преципитации

Это исследование показательно по истечению 1 месяца после инфицирования. Исследуется кровь из пальца, но иногда применяется спинномозговая жидкость.

Положительный результат (антитела в титре составляют от 1:2 до 1:320) еще не говорит, что пациент болен – окончательный итог подтверждается сдачей дополнительных тестов. Отрицательная реакция бывает следствием того, что:

обследуемый не болен;

пациент болен, но заболевание находится на начальной стадии развития.

Реакция Вассермана (PB, RW)

С помощью этого метода можно получить объективную информацию минимум на 6-й неделе после инфицирования. Говорить о наличии патологии можно, если титры антител колеблются в пределах 1:2-1:800.

Результаты при РВ оцениваются математическими знаками:

«—» – заболевания нет;

«+» или «++» – слабоположительная реакция;

«+++» – положительная;

«++++» – резко положительная.

РИФ

Эта методика является актуальной на очень ранних стадиях развития заболевания, но оптимальный период для осуществления тестирования – 6-8 недель после инфицирования. Для исследования необходима венозная или капиллярная кровь.

Положительный итог исследования выражается плюсами от одного до четырех («+»-«++++»).

Дефекты соединительной ткани и беременность нередко становятся причиной ложного результата, что выражается знаком «—».

РПГА

В ходе проведения этого исследования у обследуемого изымают немного крови из вены или пальца, затем ее смешивают с эритроцитами петуха или барана. Такой тип тестирования имеет более высокую чувствительность, т.к. он способен подтвердить наличие возбудителя в течение длительного срока после проведенного лечения. На получение ответа уходит не больше 1 часа. Проверить себя пациенты с помощью РПГА могут через 4 недели после возможного инфицирования: на более ранних сроках антитела не вырабатываются в необходимом объеме.

Насколько долго инфекция находится в крови, можно судить по титрам:

если их значение не больше 1:320, то заражение произошло относительно недавно;

чем выше титры, тем дольше бледная трепонема находится в организме пациента.

ИФА

Считается одним из самых надежных способов диагностики описанного заболевания. Использовать ИФА начали еще в конце прошлого столетия. Он будет показателен уже спустя 21 сутки после инфицирования. Положительный результат на 98-99% свидетельствует о наличии венерологического заболевания. Зачастую ИФА используют после выполнения неспецифического тестирования или в комплексе с некоторыми специфическими тестами.

ИФА-тест предоставляет возможность выяснить стадию недуга посредством выявления конкретной группы антител в крови обследуемого:

Если во взятом образце присутствуют антитела IgA, но отсутствуют IgG, IgM, то с момента попадания в организм трепонемы прошло не больше 14 суток.

При выявлении IgM и IgA, но отсутствии IgG, инфицирование произошло примерно 28 суток назад.

Если в образце имеются все перечисленные антитела, то это свидетельствует о том, что после инфицирования прошло больше 1 месяца.

В случае, если в образце отсутствует IgA, но присутствуют IgG и IgM, то после заражения прошел большой промежуток времени или терапия недуга была успешной.

РИБТ

Является одним из популярных типов диагностики заболевания. Нет смысла использовать его на ранних этапах инфицирования, но после 12-й недели итоги РИБТ-тестирования будут достоверными на 99%. Он применяется при подозрениях на сифилис внутренних органов, нейросифилис, или в комплексе с неспецифичными методиками. Если пациент принимал дюрантные (длительного действия) антибиотики, то ему придется подождать не меньше 25 суток после окончания лечения. Антибиотики из категории водорастворимых требуют меньше времени для выведения из организма – около 7-8 суток.

Кровь для исследования берется из вены (натощак), а итог интерпретируется в процентах иммобилизации:

При превышении уровня иммобилизации 50%, проведенное тестирование считается положительным.

Если уровень иммобилизации не выше 20%, то тестирование – отрицательное.

Во всех остальных случаях проводится повторное тестирование.

Иммуноблотинг

Эта методика выявления недуга является одной из новейших в настоящее время. К ней обращаются в случае, если другие способы дали сомнительный итог. При этом не все клиники проводят такое тестирование, т.к. оно дорогое.

При проведении иммуноблотинга специалист способен обнаружить даже минимальное содержание антител во взятом образце. Диагноз в итоге будет иметь точность почти в 100%.

Лабораторный анализ

Себестоимость этого исследования самая низкая. Итог можно узнать уже спустя полчаса. Для его проведения у обследуемого берут образец из эрозивных и язвенных дефектов, расположенных в области половых органов. Пораженные участки изначально протираются физиологическим раствором, чтобы обезопасить область с повреждениями от попадания вредоносных микроорганизмов. Затем с помощью специальной петли поверхность раздражается несколько минут до получения бело-прозрачной жидкости, которую затем переносят на прозрачное стекло – иногда смешивают с физраствором.

О положительном результате говорится при выявлении типичных трепонем, имеющих от 8 завитков и более. Если итог окажется отрицательным, то проводят повторную процедуру – иногда несколько раз.


Ложноположительный анализ

Часто возникает вопрос о том, могут ли быть результаты ошибочными? Да, особенно при применении нетрепонемных тестов. Причинами острых ложноположительных проб при применении РМП являются:

  • травмы, отравления;
  • инсульт;
  • воспаление легких;
  • инфаркт миокарда;
  • острые инфекционные заболевания.

Если появляются спорные результаты, то специалисты для уточнения диагноза прибегают к трепонемным серологическим тестам. При этом нужно учитывать, что хронические ложноположительные анализы часто возникают при:

  • туберкулезе;
  • лептоспирозе;
  • бруцеллезе;
  • злокачественных опухолях;
  • циррозе печени;
  • сахарном диабете;
  • саркоидозе;
  • ревматических болезнях;
  • инфекционном мононуклеозе и др.

Цена

Стоимость обследования зависит как от типа тестирования, так и от самого медицинского учреждения. По этой причине, для экономии сравните друг с другом стоимость исследования в разных клиниках города. В этом вам поможет таблица:

Название клиники в Москве

Стоимость в рублях

Первый Доктор

400

Инвитро

От 365 до 1630

Евро-Мед

500

Lab4U

180

Центр Женского Здоровья

650-800

Медицинский центр МедКлуб

200

Клиника Сесиль +

550

Медицинский центр ВИТА

От 333

Хирургическая Клиника (Семейная)

470

Лаборатория "ДиаЛаб"

От 200

Venclinica

1200 (экспресс-анализ)

Видео

Источник: https://sovets.net/17717-analiz-na-sifilis.html

Сифилис - диагностика

Диагностика сифилиса зачастую представляет сложности. Наибольшую сложность в диагностике представляют хронические формы сифилиса, вторичный сифилис, латентная фаза сифилитического поражения. Однако выявление данного заболевания должно строиться по стандартной схеме.

Обращение к врачу венерологу – зачем это нужно?

На первом этапе диагностики необходима личная консультация врача венеролога. На основании личной консультации врач венеролог в состоянии выставить клинический диагноз.

Анамнез – сбор необходимой для выявления диагноза информации: жалобы пациента, информация о некоторых аспектах половой жизни и контактах с подозрительными на наличие венерических заболеваний лицами. Перенесенные в прошлом венерические заболевания, информация о результатах их лечения. Вся эта информация позволяет лечащему врачу сконцентрироваться на наиболее вероятных заболеваниях заставивших пациента обратиться за специализированной помощью.

Далее следует клинический осмотр. Наиболее внимательному осмотру подвергаются слизистые и кожные покровы половых органов, область ануса, слизистая ротовой полости. Повышенное внимание уделяется ощупыванию наружных групп лимфоузлов, ощупыванию выявленных инфекционно некротических очагов. Часто на данном этапе диагноз сифилиса с достаточно высокой степенью вероятности можно выставить.

Однако для выставления окончательного диагноза, а так же для слежения за динамикой процесса в ходе проводимого лечения, необходимо проведение лабораторных анализов.

Лабораторное подтверждение сифилиса – что в себя включает и как производится?

Лабораторную диагностику сифилиса можно разделить на 2 группы проводимых исследований: первая позволяет выявить непосредственно возбудителя сифилиса, вторая же выявляет иммунологические изменения, происходящие в организме при сифилисе.

Как можно выявить непосредственно возбудителя сифилиса – бледную трепонему?

1. Темнопольная микроскопия. Вследствие некоторых внешних особенностей бледная трепонема плохо окрашивается традиционными красителями, используемыми в микроскопии бактерий. Потому имеется смысл использование специального темнопольного микроскопа. В нем на фоне темного фона хорошо контрастируется спиралевидная полоска - бледная трепонема.

Биоматериал для темнопольной микроскопии берется из первичного очага инфекции – из сифилитической специфической язвы, кожной сыпи, эрозии.

2. Прямая реакция флюоресценции. Данному методу диагностики предшествует обработка биоматериала специальной флюоресцирующей сывороткой, что приводит к прикреплению на поверхности бледной трепонемы специфических иммунных комплексов. В результате этой реакции при микроскопии обработанного биоматериала в люминесцентном микроскопе бледная трепонема выглядит светящейся и нарядной.

3. ПЦР (полимеразная цепная реакция). Данный метод позволяет выявить ДНК инфекционного агента, делая его присутствие в организме пациента явным.

Как выявляются иммунологические признаки наличия сифилиса, и зачем их нужно выявлять?

Вся группа исследований иммунологических показателей с целью диагностики инфекционных заболеваний называется серологией. В наше время существует множество серологических методов диагностики, однако всех их объединяет то, что в диагностике биоматериалом является кровь пациента. В отношении диагностики сифилиса все серологические тесты можно разделить на трепонемные – выявляющие антитела против структурных элементов бледной трепонемы и нетрепонемные – выявляющие иммунологические изменения, связанные с последствием деятельности бактерии.

Нетрепонемная серология

1. Микрореакция преципитации (VDRL). Данное исследование выявляет в крови пациента антитела, вырабатываемые иммунной системой против клеток, поврежденных бледной трепонемой. Данный тест обладает высокой достоверностью, но малой специфичностью. Дело в том, что выявляемые антитела могут присутствовать в крови при многих заболеваниях и патологических состояниях. Потому данный тест используют лишь как скрининг заболевания, выявляющий подозрение на заболевание. Однако этот метод обладает неоценимым преимуществом в диагностике эффективности проводимого лечения. В случае излечения пациента микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном становится негативной в отличие от других серологических видов исследования, которые еще долгое время могут давать положительный результат.

2. Реакция Вассермана. Данное исследование связано с реакцией связывания комплемента – один из механизмов реализации иммунологического ответа.

Тест оценивается в плюсах (не в крестах, как считают многие!). И реакция бывает отрицательной (в результате обследования указывается минус), сомнительной (в результате обследования указывается 1 плюс +), слабоположительной (в результате обследования указывается 2 плюса ++), положительная реакция (в результате обследования указывается 3 плюса +++), резко положительная реакция (в результате обследования указывается 4 плюса ++++).

Трепонемная серология

1. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Данный вид исследования выявляет антитела, вырабатываемые иммунной системой инфицированного человека. Для этого производится взаимодействие сыворотки крови пациента и специфического препарата, содержащего антитела. После смешивания плазмы крови пациента и реактива со специфическими антителами, меченными специальным флюоресцирующим веществом, происходит их связывание. Исследование производится посредством специального люминесцентного микроскопа.

2. Иммуноферментный анализ (ИФА). О данном анализе стоит рассказать поподробнее. Так как он является основным при выявлении большинства инфекционных заболеваний. Основан метод на избирательной высокоспецифичной реакции антиген – антитело. Одной из особенностей данного анализа является то, что с его помощью можно выявить антитела различных классов (IgA IgM IgG) . Так же важным является способность данного анализа определять количество выявляемых антител. В итоге определение типа антител и его количественной составляющей позволяет сделать ряд выводов о длительности заболевания, динамике процесса, активности возбудителя и иммунной системы пациента. В итоге данный анализ оказался незаменимым в деле диагностики инфекционных заболеваний, а так же как контроль динамики заболевания на фоне проводимого лечения.

3. Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Данная реакция основывается на иммунологически индуцированном склеивании эритроцитов. Механизм данной реакции заключается в том, что предварительно подготавливаются эритроциты, на поверхности которых фиксированы белковые компоненты бледной трепонемы. Потому, при смешивании с плазмой крови, содержащей антитела к трепонеме, происходит склеивание эритроцитов – кровь из красной превращается в зернистую. Положительной реакция гемагглютинации становится спустя 4 недели после инфицирования. После успешного лечения сифилиса данная реакция в течение всей жизни может оставаться положительной.

Из вышеизложенного понятно, что дело диагностики, контроля эффективности лечения и излеченности – достаточно сложная и трудоемкая работа. А уж пациенту, не имеющему медицинского образования разобраться в целях и результатах исследования невозможно. Однако мы постараемся изложить в доступной форме динамику иммунологических изменений на разных стадиях сифилиса, и лабораторные показатели выявляющие данные изменения.

Итак – немного теории. После инфицирования иммунные клетки впервые встречаются с бледной трепонемой. Идентифицируя ее как чужеродный микроорганизм, иммунокомпетентные клетки начинают активное формирование иммунного ответа. Антитела, специфически действующие на бледные трепонемы класса IgM, обнаруживаются в крови пациента спустя 7 дней после инфицирования, антитела IgG синтезируются позже – спустя через 4 недели. Эти 2 класса антител различны по своей структуре, но важно для диагностики то, что IgM синтезируется на ранних стадиях инфицирования (что говорит о недавнем инфицировании) или при наличии высокой активности инфекции. Выявление IgG говорит лишь о формировании стойкого иммунитета к данной инфекции, лишь серия анализов титра антител в динамике позволяет оценить излеченность заболевания или активность инфекции. Антилипидные (неспецифические) иммунологические комплексы активно синтезируются спустя 4 - 5 недель после инфицирования.

Важными является тот факт, что в период клинических проявлений сифилиса в крови выявляются специфичные для бледной трепонемы антитела как IgM, так и класса IgG (суммарные антитела). Важным параметром в процессе лечения является изменение количественных параметров антител. Правильно подобранное лечение способствует резкому снижению концентрации IgM, на фоне стабильного уровня IgG – эти показатели говорят о сформировавшемся стойком иммунитете к бледной трепонеме на фоне снижения ее инфекционной активности. Необходимо обратить внимание на то, что специфические антитела к трепонеме могут сохраняться в крови человека на долгие годы, давая положительные результаты некоторых видов исследований.

Как интерпретировать результаты серологических исследований?

В настоящее время в медицинской практике нашли широкое применение 3 реакции: микрореакция преципитации, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).

микрореакция преципитацииреакция иммунофлюоресценции (РИФ)реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)Интерпретация
- - - Инфицирование отсутствует или диагностика проведена слишком рано (до 7 дней после инфицирования)
+ + + Подтверждение сифилиса
- + + Состояние после проведенного лечения сифилиса или поздняя стадия сифилиса
+ - + Велика вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов (рекомендуется повторить серологическую диагностику)
- - + Велика вероятность ложноположительной реакции РПГА, или состояние после адекватного лечения сифилиса
- + - Свидетельство раннего сифилиса или состояния после произведенного лечения, ложноположительная реакция РИФ
+ - - Ложноположительная реакция микропреципитации

Из вышеизложенной таблицы с результатами основных серологических тестов видно, что диагностика сифилиса не может быть основана лишь на одних серологических исследованиях. Для выставления окончательного диагноза помимо анализов крови, необходим комплекс клинических исследований: анамнез, личный осмотр пораженных областей, выявление подозрительных контактов.

Автор: Ткач И.С. врач, хирург офтальмолог

Источник: https://www.tiensmed.ru/news/sifilis-diagnostika1.html

Анализ на сифилис RPR

Инфекционная патология, спровоцированная бледной трепонемой, поражающая большую часть органов и систем организма индивида, называется сифилисом. Исследование на сифилис RPR считается основным для диагностирования заболевания. Благодаря этому тесту обнаруживаются неспецифические антитела иммуноглобулинов класса M и G. Данный анализ рекомендован не только для контроля лечения больных сифилисом, но и для первичного выявления лиц, подвергшихся заражению.

Кратко о сифилисе

Это хроническое инфекционное заболевание, при котором поражаются органы и системы организма. Возбудитель болезни отлично выживает в биологических средах – сперме, слизи, гное, влагалищном секрете. Существует несколько путей заражения этим венерическим заболеванием:

  • половой;
  • парентеральный;
  • бытовой;
  • трансплацентарный.

После инфицирования в организме синтезируется два вида антител:

  • Специфические, или противотрепонемные, они направлены против самой трепонемы.
  • Неспецифические, или антикардиолипиновые, действуют против клеточных компонентов, которые, поражаясь возбудителем болезни, разрушаются, а также против липидов организма, попадающих в кровяное русло после гибели клеток естественным путем. Исследование на сифилис RPR как раз и выявляет неспецифические антитела к липидным компонентам.

В составе возбудителя есть антигены, на которые иммунная система индивида синтезирует антитела. Один из антигенов сходен с кардиолипином, благодаря этому его используют для обнаружения иммунного ответа к трепонеме.

Кровь на сифилис

Инкубационный период в среднем составляет 21 день. Различают сифилис:

  • Первичный – с момента появления твердого шанкра (язвочки возникают в месте внедрения бактерии, исчезают они самостоятельно через две-шесть недель) и до образования сыпи. Наблюдается увеличение лимфатических узлов. В этот период антитела еще не выработались и в крови их не выявить.
  • Вторичный – такие симптомы, как общее недомогание, повышение температуры, головная боль, сыпь, выявляются через месяц или два после образования язв. Вскоре признаки заболевания исчезают, и болезнь переходит в латентную стадию. Низкий иммунитет провоцирует рецидивы, так как возбудитель не исчезает из организма. Клиническая картина в этом случае сходна со вторичным сифилисом.
  • Третичный – возникает при отсутствии терапии в течение длительного периода. Поражаются органы и системы организма.

Подтверждают диагноз лабораторной диагностикой.

Общая информация об исследовании

Для диагностики сифилиса применяют две группы анализов – трепонемные и нетрепонемные. К последним относится исследование на сифилис RPR. Тест прост в постановке реакции, ответ готов через короткий промежуток времени. Чувствительность зависит от стадии заболевания и составляет при сифилисе:

  • позднем – 73 %;
  • вторичном – 100 %;
  • первичном – 86 %;
  • скрытом – 98 %.

Среди преимуществ этого теста выделяют:

  • быстрый ответ;
  • высокую чувствительность среди всех других нетрепонемных анализов при позднем, первичном и скрытом заболевании;
  • возможность использования при массовых скринингах;
  • низкую цену анализа;
  • наличие готовых наборов для исследования;
  • высокую сочетаемость с трепонемными тестами.

Министерство здравоохранения Российской Федерации рекомендует этот анализ для контроля за процессом лечения и в качестве первичного скрининга.

Положительная реакция наблюдается по прошествии трех-пяти недель после инфицирования или через семь-десять дней после появления язвочек. На вторичной стадии заболевания титры снижаются. Снижение титра в четыре и более раза на протяжении года свидетельствует об эффективности проводимой терапии.

Нетрепонемные тесты

Используя их, обнаруживают антитела против липида, входящего в мембрану бактерий и митохондрий. Они появляются в организме индивида через неделю после образования твердого шанкра. Чувствительность нетрепонемных тестов высокая при первичном и вторичном сифилисе, т. е. если человек заражен, то итог будет положительным. Однако не исключены и ложноположительные результаты, так как образуются антитела против липида и при других патологических состояниях. Особенность нетрепонемных тестов – это появление антител в остром периоде болезни. Таким образом, при выздоровлении их количество снижается, что свидетельствует о качестве лечения.

Микрореакция преципитации на сифилис

Основано это исследование на иммунологической реакции "антиген - антитело". Микрореакция на сифилис RPR – это нетрепонемный тест, благодаря ему выявляют реагиновые антитела в крови, которые производятся организмом индивида против липидов дефектных клеток в результате их повреждения спирохетой, а также белков липопротеинов кожицы бактерий.

Ввиду того что антилипидные антитела синтезируется и при других патологиях, сопровождающихся разрушением ткани, микрореакцию преципитации относят к отборочным тестам. Для проведения исследования требуется небольшое количество реагентов и биоматериала (кровь, жидкость спиномозговая) поэтому оно и получило название "микрореакция".

Ошибки при постановке микрореакции преципитации

К ложноположительным и ложноотрицательным итогам приводят погрешности, допущенные при проведении исследования на сифилис RPR:

  • Наличие микроорганизмов в эмульсии.
  • Применение двузамещенного цитрата натрия (disodium citrate) вместо трехзамещенного (trisodium citrate).
  • Несоблюдение условий и сроков хранения антигена, растворов, эмульсии, биоматериала.
  • Некачественное взбалтывание, что ведет к неравномерной концентрации антигена в эмульсии.
  • Нарушение технологии взятия крови из пальца.
  • Использование грязных пробирок, растворов, пластинок, пипеток.

Исследование на сифилис

С помощью лабораторного анализа крови на сифилис (RPR, RW) выявляют антитела к возбудителю инфекции, т. е. бледной трепонеме.

Проводится это исследование при массовом обследовании некоторых групп населения на сифилис. Кроме того, анализ показан:

  • всем индивидам перед хирургическим вмешательством;
  • лицам, имеющим партнера с диагностированным заболеванием, и в случае бытового контакта с больным вторичным сифилисом;
  • индивидам, имеющим подтвержденный диагноз иной половой инфекции;
  • малышам, родившимся от материи, болеющей сифилисом;
  • лицам с клиническими симптомами сифилиса;
  • с целью подтверждения результатов скрининга;
  • женщинам, ожидающим малыша;
  • донорам;
  • лицам, имеющим неразборчивые половые связи;
  • при болевом синдроме в костях;
  • при обильных выделениях из половых органов и появлении язвенных поражений на гениталиях, сыпи на дерме и слизистой, а также при увеличении лимфатических узлов.

Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест)

Антикардиолипиновый тест – это один из вариантов реакции Вассермана, точнее сказать, более современный анализ, с помощью которого обнаруживают иммуноглобулины G и M к фосфолипидам, появляющимся из клеток, пораженных возбудителем. Он относится к неспецифическим тестам, и возможны ложноположительные результаты, так как антитела к фосфолипидам выявляются и при других болезнях инфекционного и аутоиммунного характера. Рекомендуют это исследование:

  • при обследовании доноров;
  • диагностике скрытого сифилиса;
  • подозрении на заболевание.

Антикардиолипиновые тела выявляются примерно у восьмидесяти процентов индивидов с первичным и у ста процентов – со вторичным сифилисом. Положительный анализ на сифилис RPR регистрируется через семь дней после возникновения твердого шанкра, т. е. примерно через месяц после заражения.

Подготовка к исследованию

Особой подготовки к анализу не требуется. Биоматериал сдают утром, на голодный желудок. За двенадцать часов до похода в лабораторию следует исключить кофейные, чайные, спиртосодержащие напитки, а также прием пищи. Разрешается выпить простой воды. Накануне исключают прием жирных продуктов. За шестьдесят минут до сдачи биоматериала противопоказано табакокурение. В день сдачи анализа нежелательно выполнять следующие манипуляции:

  • флюорографическое или рентгенологическое исследование;
  • УЗИ;
  • физиотерапевтические процедуры.

Расшифровка результатов

Отрицательный RPR на сифилис означает:

  • Инфекция отсутствует, сифилиса нет.
  • Ранний первичный и поздний третичный сифилис не исключается. Если с момента внедрения возбудителя прошло менее трех недель, то антитела против кардиолопина могут не выявиться. Для контроля рекомендуется повторить тест через две недели. После вторичной стадии количество антител уменьшается и у части пациентов итог будет отрицательным.

Положительный результат говорить о следующем:

  • первый год после того как вылечили болезнь;
  • серопозитивный первичный, вторичный и третичный сифилис.

При получении положительного ответа индивиду необходимо дополнительное обследование у венеролога.

Ввиду того что тест неспецифический, остается вероятность ложноположительных итогов. Наиболее часто такое встречается при следующих состояниях:

  • воспаление легких;
  • диабет сахарный;
  • гепатит вирусной природы;
  • туберкулез;
  • алкоголизм;
  • беременность;
  • после вакцинации;
  • онкология;
  • наркомания.

Доктора оценивают терапию сифилиса эффективной при условии, что количество неспецифических антител в крови у индивида в течение двенадцати месяцев снизится в четыре раза. После полного завершения курсового лечения исследование крови на сифилис RPR дает отрицательный результат у девяноста процентов больных.

Заключение

Исследование крови дает возможность обнаружить антитела к возбудителю венерического заболевания, т. е. бледной трепонеме. Сдают анализ не только индивиды, предпочитающие активную половую жизнь, но и пациенты перед операцией, будущие мамочки и некоторые другие категории граждан. Для достоверности картины к сдаче теста доктора рекомендуют подготовиться.

Исследование на сифилис RPR не проводится для диагностирования заболевания, и об этом надо помнить. Подтверждают болезнь трепонемными тестами. Окончательный диагноз выставляет только доктор.

Автор: Светлана Павлова

Источник: http://fb.ru/article/426334/analiz-na-sifilis-rpr